超高效聚合物色谱系统

超高效聚合物色谱系统

仪器型号：ACQUITY APC
生产厂家：美国Waters公司
主要配置：一体式独立柱塞，数控直线驱动色谱泵技术，双压力传感器反馈回路，
主动式溶剂蒸汽抽吸装置，eCord色谱柱信息记录，超高效示差折光检测器，
超高效凝胶色谱柱
主要技术指标：
测定的分子量范围：
  l    测量范围：7.0*10^-9RIU~5.0*10^-4RIU
  l    流速范围：10μL/min ~2.0 mL/min， 流量精度：0.075%，流速准确度：±1.0%；
  l    进样范围：0.5~50 mL，进样精度：<0.5%RSD；
  l    柱温箱控温范围：4~90℃，控温精度：±0.5℃，最高耐压：15000psi
  l    流通池体积：1.3μL，内部管路体积：<15μL；
  l    超高效凝胶色谱柱粒径：≤ 2.5μm
主要用途：            
  Ø    快速获得可重复的精确聚合物分子量信息

ACQUITY APC超高效聚合物色谱系统

使用操作规程

一、适用对象

1、接受过ACQUITY APC超高效聚合物色谱系统专业培训者；

2、已详细阅读过ACQUITY APC超高效聚合物色谱系统使用手册者；

3、接受过ACQUITY APC超高效聚合物色谱系统专业培训者的正确指导下的操作者。

二、使用操作规程

1、根据待测样品溶剂相换好流动相→打开仪器，计算机，Empower3软件→通过控制ISM等度溶剂管理器，用色谱纯四氢呋喃或色谱纯水对仪器以0.1流速进行过夜灌注冲洗（下面以四氢呋喃流动相为例）。

2、将标准样品以及待测样品依次放入SM-FTN样品管理器样品盘→进入软件Empower3→选择“运行样品”→新建项目→创建方法组包括“仪器方法”、“方法组方法”、“样品组方法”→样品测试→新建“数据处理方法”→得到测试报告

3、新建项目：Empower3界面→“配置系统”→右键“新建”→表空间（2000M）-去除“全面审计追踪”→选择GPC→默认，下一步→选择GPC Default→命名项目名称，项目建立完成。

4、新建仪器方法：Empower3界面→选择“运行样品”→点击“调用方法组编辑向导”图标→“新建”→点击ISM等度溶剂管理器，进入常规-选择溶剂-四氢呋喃；流量梯度（0-1，不超过2）；压力界限（下：0，上：<15000）；其他-流速的加速度（默认）→点击SM-FTN样品管理器，进入通用-溶剂-清洗溶剂名，清除溶剂名（四氢呋喃）预进样清洗/后进样清洗（默认），温度控制（默认，样品温度需要在0-40范围内），其他默认→点击CMS色谱柱管理器，通用-温度-色谱柱35℃→点击示差显示器RI，常规-流通池-温度35℃→点击文件-另存为-命名，仪器方法建立完成。

5、新建方法组方法：文件-打开刚组建的仪器方法→点击文件-用方法组保存-保存-命名，方法组方法建立完成。

6、新建样品组方法：点击“编辑样品版”→选择“ANSI-48Vial2mLHolder”样品盘→正确填写与放置样品位置对应的准确信息包括 “进样体积”（10微升），“进样数”，“样品名”，“方法组/报告方法”，“运行时间”（例如1:A,5表示1号盘A5号位置）→点击“文件”-“样品组方法另存为”-命名，样品组方法建立完成。

7、样品测试：回到Empower3打开界面→选择“运行样品”→执行ISM灌注1次（1-2min）→FTN管理器灌注2次（条件默认）→RI示差检测器清除（>20min）→平衡基线（ “设置平衡/系统监视器”图标-选择新建的仪器方法-平衡/监视器-30min）→基线走稳后，调用样品组方法（点击“打开样品组方法” 图标-新建的样品组方法）→执行样品序列（点击 “执行已编辑的序列”图标-运行），测试开始。

8、新建数据处理方法：回到Empower3打开界面→点击“浏览项目”-”“通道”-“更新”→按ctrl选中自己测试的几个标准样数据（窄分布标准样）→右击 “查看”→新界面的“重叠”（查看参比样的出峰情况）→点回“重叠”→GPC处理方法处理数据（文件-新建-处理方法-处理类型GPC-确定）→新界面“积分-峰检测器1-R1”→峰宽（默认）→阈值（默认）→设置积分区域→最小峰高和最小峰面积过滤没有用的峰→GPC校正（校正-相关，5阶拟合方式，体积，流速-运行样品时的流速）→默认→命名，处理方法建立完成。

9、处理标准品曲线：回到Empower3界面→点击“浏览项目”-“通道”-“更新”→按ctrl选中自己测试的几个标准样数据（窄分布标准样）→右击“改变样品”→点击新界面图标“量”→输入标准样的分子量（新界面-当前-输入有大到小的峰值，将全部标准样输入，确定）→文件，保存→回到“通道”-“更新”→按ctrl选中自己测试的几个标准样数据（窄分布标准样）→右键“处理”→选择新建的处理方法→点击“结果”-“更新”可以看到计算结果→选中三个结果→右击“预览/出版”，得到标准品曲线（报告方法选择“ReadyCal SIT Cal Summary”）。

10、计算测试样品分子量：选择“通道”-“更新”-测试样品结果（窄分布标准样）→右键“处理”→选择新建的处理方法→“结果”-“更新”-选择测试样品的结果→右键“预览/出版”，得到测试样品的曲线和分子量。

11、保存数据：回到Empower3界面→“配置系统”→选择自己操作的项目→右键“备份项目”→结果保存。

12、测试完成后，利用四氢呋喃流动相进行灌注冲洗0.1流量过夜或者0.2流量半天，如若在2天内有测试，开启循环灌注，如果2天以上不使用仪器，则在四氢呋喃冲洗后，再用色谱纯的异丙醇进行灌注冲洗0.1流量过夜或者0.2流量半天，再关闭软件，仪器，计算机，填写仪器使用记录。

注意事项：

1、测试样品一定要进行过滤，防止色谱柱堵塞。

2、测试完成一定要进行项目备份防止数据丢失。

浙江省清洁染整技术研究重点实验室

                                                二零一五年十二月一日